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色谱是一种离别剖析办法，离别是重点，因而，承担离别效用的色谱柱是色谱系统的心脏。色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接洽、螺丝等构成，没有色谱柱就不能实行离别、定性与定量了，色谱柱是依照柱子里的填充物不同来区其它，填充物又是依照须要离别的物资的极性来抉择的。。。
液相色谱柱的操纵办法：
1.色谱柱的操纵讲授：
（1）色谱柱操纵前细致事变：
色谱柱的积聚液无非凡讲授，均为评估汇报所示的起伏相。在操纵前，肯定要细致色谱柱的积聚液与要剖析样本的起伏相能否互溶。在反相色谱中，如，用高浓度的盐或缓冲液做洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，不然缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很轻易析出，梗塞色谱柱。
（2）起伏相：
起伏相中所操纵的各样有机溶剂要尽也许操纵色谱纯，配起伏相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。倘若将所配得起伏相再经由0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤为是含盐的起伏相。此外，装起伏相的容器和色谱系统中的在线过滤器等安装应当按期洗涤或退换。以惯例硅胶为基质的键合相填料每每的pH值合用界限是2.0～8.0，BDSC18合适于碱性化合物，pH值合用界限为2.0～10.0。当必须要在pH值合用界限的界限前提下操纵色谱柱时，屡屡操纵完成后马上用合适于色谱柱积聚并与所操纵的起伏互相溶的溶剂洗涤，并齐全置换掉原本所操纵的起伏相。
（3）样本：
样本也要尽也许洁净，可采用样本过滤器或样本预收拾柱（SPE）对样本实行预收拾；
若样本不便收拾，要操纵守护柱，在用正相色谱法剖析样本时，全部的溶剂和样本应矜重脱水。
2.色谱柱的保管：
（1）反相色谱柱天天测验后的调养：
操纵缓冲液或含盐的起伏相，测验实现后运用10%的甲醇/水洗涤30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇洗涤30分钟。细致：不能用纯水洗涤柱子，应当在水中插手10%的甲醇，避让将填料冲陷落。
（2）永久保管色谱柱：
如，色谱柱要永劫间保管，必需存于适宜的溶剂下。关于反相柱也许积聚于纯甲醇或乙腈中，正相柱也许积聚于矜重脱水后的单纯己烷中，离子相易柱也许积聚于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将置备新色谱柱时附送的堵头堵上，积聚的温度最好是室温。
3.色谱柱的更生由于色谱柱是损耗品，跟着使历工夫或进样次数的增进，会浮现色谱峰高消沉，峰宽加大或浮现肩峰的局势，寻常来讲也许是柱效下落。
（1）反相柱的更生：
挨次采纳20～30倍的色谱柱体积的甲醇：水=10：90（V/V），乙腈，异丙醇做为起伏相洗涤色谱柱，实现后再以相悖依序洗涤色谱柱。
（2）正相柱的更生：
挨次以20～30倍色谱柱的体积的正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇做为起伏相洗涤色谱柱，而后再以相悖的依序洗涤色谱柱。要细致上述溶剂必需矜重脱水。
4.色谱柱在操纵流程中易浮现的题目妥协决办法色谱柱在操纵中最罕见的题目即是柱压抬高，倘若柱压是在永劫间操纵流程中迟钝增进，属于寻常局势。但柱压在操纵流程中倏地抬高（系统管路梗塞及压力传感器阻碍除外），也许的缘故犹以下几点：
（1）色谱柱头的过滤筛板梗塞或浑浊；
（2）色谱柱头的填料被样本浑浊；
（3）色谱柱内缓冲液中的盐碰到高浓度的甲醇或其余有机溶剂，产生结晶析出；
（4）起伏相pH值过大或太小使稳固相机关毁坏或消融。
收拾办法以下：
（1）如断定是色谱柱头的过滤筛板被浑浊，也许将色谱柱反方位用甲醇洗涤至寻常压力，或许脱掉色谱柱头，将其放在10％的稀硝酸内超声洗涤10分钟，后再用纯水超声10分钟，从头装入色谱柱。
（2）如断定色谱柱头的填料被浑浊，将柱头螺丝脱掉，挖出柱内前段被浑浊的填料，用类似的柱填料从头填入，小心修理后，从头安置上柱头螺丝。
（3）如断定定是盐结晶，用10%的甲醇/水洗涤色谱柱使柱内盐全部消融，再换高浓度甲醇。
（4）倘若因pH值操纵不妥，很难复原。
液相柱：卡套柱的安置（不加预柱）1.将卡套架套入柱芯2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夹套（见左图）3.将已套到柱芯上的卡套架进取推，直至高过夹套片4.将卡套帽和卡套架旋在一同，而后用手拧紧5.而后依同样的依序连合好柱子的另一端6.连合到液相色谱仪，PEEK接洽手拧便可；若为不锈钢接洽应操纵专用扳手
细致：
操纵卡套柱时，两头的卡套适功夫连合在柱芯上。不论您是均衡色谱柱或是洗涤，任何功夫都不能将卡套取下来，不然会产生填料的散失。
卡套柱的安置（加预柱）：
1.将卡套架套入柱芯；2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯；3.将已套到柱芯上的卡套架进取推，直至高过夹套片；4.将“枪弹头”预柱放入卡套片内；5．将卡套帽和卡套架旋在一同，而后用手拧紧；6．而后依同样的依序连合好柱子的另一端7．连合到液相色谱仪，PEEK接洽手拧便可；若为不锈钢接洽应操纵专用扳手退换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片（同时也许补缀色谱柱）
细致：
在掏出反相柱芯的滤网和玻璃片以前，应当将色谱柱充足用水和甲醇/乙腈洗涤，并且补缀用具的头部也应当蘸取小量的甲醇/乙腈，以避让在掏出滤网和玻璃棉滤转瞬带出柱子内的填料。1.将补缀用具中的2套入柱芯的顶端；2.将补缀用具中的3微微地旋入已套着2的柱芯中，并顺时针方位回旋到旋紧；3.一手握柱芯，另一只手微微地向外拉3，掏出柱芯顶端的滤网；4.用一个小铲子微微地掏出滤网上面的玻璃棉以及被浑浊的填料；5.将新的填料用甲醇潮湿，而后填入挖去的部位，压平；6.照（左图）装上新的玻璃棉滤网，并用补缀用具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端；7.柱芯顶端套上2，而后将滤网放入；8.压紧，而后取下2，再用4将滤网的边际压平；
均衡流程中，将流速迟钝地抬高用起伏相均衡色谱柱直到得到不变的基线（缓冲盐或离子对试剂度倘若较低，则须要较长的工夫来均衡）
色谱柱的更生
实行色谱柱更生时，应操纵一个谦价的泵，咱们发起最好不操纵您的高效液相色谱仪上的泵。细致：在对NH2改性的色谱柱实行更生时，由于NH2也许成铵根离子的表面存在，因而，应当在水洗后用0.1M的氨水洗涤，而后再用水洗涤至碱溶液齐全流出。倘若简明的有机溶剂/水的收拾不也许齐全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸洗涤特别有用。
色谱柱的保护
1.操纵预柱守护剖析柱（硅胶在极性起伏相/离子性起伏相中有肯定的消融度）；2.大大都反相色谱柱的pH不变界限是2～7.5，只管不高出该色谱柱的pH界限；3.避让起伏相构成及极性的激烈变动；4.起伏相操纵前必需经脱气和过滤收拾；5.倘若操纵极性或离子性的缓冲溶液做起伏相，应在测验了结柱子洗涤明净，并保管大乙腈中；6.压力抬高是须要退换预柱的记号；
色谱柱储存
当毛细管色谱柱从GC拆下时，应当储存在原本的盒子里。将GC隔垫插在柱两头以避让碎片投入柱内。一旦要从头安置色谱柱，则须要从柱头截去2-4厘米以保证隔垫碎屑不会梗塞在柱子内。
色谱柱的安置寻常看仪器讲授书就好了，各气体流速的配置要依照详细须要配置，怎样老化也可查质料得到，重若是在操纵流程中的保护。曾产生过有人将空气瓶当氮气瓶换上，操纵者又不能准时发掘，觉得柱子受浑浊，就升温老化，进而报废了一条50米FFAP和一条60米INNOWAX毛细柱，是以要珍视保护。色谱柱用过一段工夫后可将探测器和进样器两头变更过来安置操纵。
液相色谱柱的操纵细致事变:1.细致操纵的PH界限,硅胶柱的界限较窄多为3-8,但耐高压;基质为会合物的耐高压机能不如硅胶柱,但他的PH操纵界限很宽,多为1-14.2.细致柱子的疏水机能,免得产生柱子的陷落.3.细致起伏相盐度,免得损伤仪器.4.柱子永劫间不必以及屡屡操纵先后都要洗涤.5.要根据样本的成份采用适宜的守护柱.
气相色谱柱之柱子的老化
保证载气流过毛细管柱15~30min；迟钝程序升温（5℃/min）到老化温度；最后老化温度≥4hours；倘若柱子遭到浑浊。可在举荐的最高色谱柱温度低20℃的前提下，老化柱子；
寻常举荐的老化温度为：Tcond=Tmax/2+Tapp/2；
这边：Tcond=老化温度；Tmax=色谱柱举荐采纳的最高温度；Tapp=运用中操纵的最高温度；
在老化柱子时，肯定不要将毛细管接在探测器上，应将那一端放空，同时将探测器用闷头堵上。倘若是FID，允许接在上头，但应当将探测器温度升上去。
对色谱柱升至一恒定温度，每每为其温度上限。非凡境况下，可加热至高于最高操纵温度10～20度左右，不过肯定不能高出色谱柱的温度上限，那样极易毁坏色谱柱。当抵达老化温度后，记载并张望基线。初始毛细管柱?WCOT-内表面涂有很薄的稳固相.?PLOT-内表面涂有多孔的固体层或吸附剂?SCOT-内表面先涂固态载体，而后再涂上稳固相。由于毛细管色谱柱柱效很高，对寻常的样本备用三种极性的柱子就可以收拾大部份题目，但对同分异构体要矜重采用专用毛细管色谱柱。
按样本极性抉择:弱极性样本：可选OV-1，SE-30，OV-，SE-52，SE-54。中极性样本：可选OV-17，OV-，XE-60，OV-，OV-。极性样本：可选PEG-20M,FFAP,OV-,DEGS。
按酸碱性抉择:碱性样本：弱碱性可选OV-1，SE-30等；
强碱性可选碱性PEGB《br》酸性样本：FFAP按沸点抉择:高沸点物资可选OV-1，SE-30，SE-54等交联柱，薄液膜
毛细管内径的抉择制品剖析：小口径0.25mm，0.32mm，薄液膜；痕量组分剖析：大口径，厚液膜，0.53mm；※汽化温度：比样本沸点高20～30℃；※柱温：首选在样本沸点的0.7倍处，再看离别境况调动；※探测温度＞柱温＞℃（FID）；※分流比：小口径＞:1；大口径10～50:1或不分流进样（用专用接洽）；※尾吹：15～30ml/分（知足FID请求）；
※隔阂打扫气：1～5mL/分；※进样量：0.3～0.5μl；※定性与定量；定性与填充柱色谱同样，或GC/MS量，寻常用归一法或内标法定量。
操纵环节：
1)掏出记载本备案操纵者和发端工夫。2)翻开净化器上的载气开关阀，而后检讨能否漏气，保证气密性优良。3)调动总流量为合适值（依照刻度的流量表测得）。4)调动分流阀使分流流量为测验所需的流量（用皂膜流量计在气路系统面板上的《SPLITVENT》本质衡量），柱流量即为总流量减去分流量。5)调动尾吹流量掌握阀使尾吹流量为合适值，并使尾吹流量与柱流量之和不低于载气总流量。6)翻开净化器的空气、氢气开关阀，调动空气、氢气流量为合适值。7)依照测验须要配置柱温、进样口温度和FID探测器温度。8)FID探测器温度抵达oC以上，按FIRE键点燃FID探测器火焰。9)配置FID探测器伶俐度和输出记号衰减。10)倘若基线不在零位，调动调零电位器A使FID输出记号在记载仪或积分仪零位相近。待所设参数抵达配置时，便可实行剖析。11)待所设参数抵达配置时，便可进样剖析。
细致事变：
1)详细赏玩操纵讲授由负责人审核后方可自力操纵；2)各样气体流量在试探出最好前提后可稳固操纵；3)仪器屡屡操纵应详细备案；
气相色谱柱的抉择
增进柱长可抬高离别功效，但柱长太长，使剖析工夫拉长，是以在知足肯定分
离度的前提下，应采用尽也许短的色谱柱。填充柱的柱内径寻常为3~6mm，毛细管柱的内径0.1~0.5mm。
稳固液的用量抉择：
担体的表面积较大时，稳固液用量可多些，赞成的进样量也响应增进。但赶快率方程式的传质项中可知，为了减小液相的传质阻力，应使稳固液的液膜厚度尽也许薄，但稳固液液膜太薄，则赞成的进样量也就越少。因而稳固液的用量要依照详细境况决计。
稳固液的配比抉择：
（指稳固液与担体的品质比）寻常为5:到25:。担体比表面积越大，稳固液用量的比例也许越高。
担体的性质和粒度抉择：
若担体的比表面积大，孔径散布平均，则稳固液易散布平均，进而可加速传质流程，抬高柱效。故应当采用颗粒小且平均的担体，并尽也许填充平均，以淘汰涡流散布，抬高柱效。但粒渡太小，填充不易平均，会使柱压降增大，对操纵不利。寻常对4~6mm的柱管，采用60~80目或80~目标担体较为适宜。
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