看到你就赚到了,超详细的高效液相色谱常见

  压力反常

操纵压力的转变通常是阻碍的征候。从下表中找出所考察到的表象,并在右边的列表中参考相应的束缚法子。

A、没有压力显示,没有震动相震动

道理

束缚法子

、电源题目

、接通电源,开机

2、保障丝被烧坏

2、改换保障丝

3、遏制器设定不确实或设定失利

3、a、采纳妥当的设定

b、修缮或改换遏制器

4、柱塞杆折断

4、改换柱塞杆

5、泵头内有空气

5、溶剂脱气、启动泵抽出空气

6、震动相不够

6、a、增多震动相

b、改换出口滤头

7、单向阀毁坏

7、改换单向阀

8、漏液

8、拧紧或改换手紧讨论

B、震动相震动寻常,但没有压力显示

道理

束缚法子

、仪容毁坏

、改换仪容

2、压力传感器毁坏

2、改换压力传感器

C、压力接续偏高

道理

束缚法子

、流速设定太高

、调动流速设定

2、柱前筛板淤塞

2、a、在答应情状下反冲色谱柱

b、改换筛板

c、改换色谱柱

3、震动相哄骗失当或缓冲盐的结晶沉没

3、a、哄骗妥当的震动相

b、冲刷色谱柱

4、色谱柱筛选失当

4、筛选妥当的色谱柱

5、进样阀毁坏

5、洗濯或改换进样阀

6、柱温过低

6、抬高温度

7、遏制器反常

7、修缮或改换遏制器

8、守护柱壅塞

8、洗濯或改换守护柱

9、在线过滤器壅塞

9、洗濯或改换在线过滤器

D、压力接续偏低

道理

束缚法子

、流速设定过低

、调动流速

2、系统漏液

2、肯定漏液地位并修理

3、色谱柱筛选失当

3、筛选妥当的色谱柱

4、柱温太高

4、低沉温度

5、遏制器反常

5、修理或改换遏制器

E、压力陆续高涨

道理

束缚法子

、见列表C

、见列表C

F、压力降为零

道理

束缚法子

、见列表A、B

、见列表A、B

G、压力陆续降落,但不回零

道理

束缚法子

、见列表D

、见列表D

H、压力摇荡

道理

束缚法子

、泵中有气体

、a、溶剂脱气

b、从泵中撤除气体

2、单向阀毁坏

2、改换单向阀

3、泵密封毁坏

3、改换泵密封

4、脱气不充足

4、a、溶剂脱气

b、转变脱气法子(哄骗在线脱气法等)

5、系统漏液

5、肯定漏液地位并修理

6、哄骗梯度洗脱

6、由于震动相粘度的转变引发的压力摇荡

2

漏液

常常能够经过拧紧或改换管路讨论来束缚漏液的题目。但值得注视的是过份拧紧会致使金属讨论的漏液和塑料讨论的磨损。要是经过轻微拧紧讨论不能束缚漏液的题目,就务必将讨论取下,查看能否毁坏(比如,卡套毁坏、密封表面有杂质);毁坏的讨论应当改换掉。

A、讨论处漏液

道理

束缚法子

、讨论松动

、拧紧

2、讨论磨损

2、改换

3、讨论过紧

3、a、拧松,再从头拧紧

b、改换

4、讨论被混浊

4、a、拆下洗濯

b、改换

5、部件不般配

5、哄骗统一品牌的配件

B、泵漏液

道理

束缚法子

、单向阀松动

、a、拧紧单向阀(无须拧的过紧)

b、改换单向阀

2、讨论松动

2、拧紧讨论(无须拧的过紧)

3、搀杂器密封毁坏

3、a、改换搀杂器密封

b、改换搀杂器

4、泵密封毁坏

4、修理或改换泵密封件

5、压力传感器毁坏

5、修理或改换压力传感器

6、脉冲阻尼器毁坏

6、改换脉冲阻尼器

7、比例阀毁坏

7、a、查看隔阂,要是漏液急忙改换

b、查看手紧讨论,毁坏的急忙改换

8、放空阀的毁坏

8、a、拧紧放空阀

b、改换放空阀

C、进样阀漏液

道理

束缚法子

、转子密封毁坏

、从头装配或改换进样阀

2、定量环壅塞

2、改换定量环

3、进样口密封松动

3、调动

4、进样针头尺寸不符合

4、哄骗妥当的进样针

5、废液管中形成虹吸

5、维持废液管高于废液液面

6、废液管壅塞

6、改换或疏通废液管

D、色谱柱漏液

道理

束缚法子

、尾端讨论松动

、拧紧讨论

2、卡套内有填料

2、拆下、洗濯卡套、从头装配

3、筛板厚度不符合

3、哄骗符合的筛板(参考下表)

E、筛板筛选提拔

物资粒径

筛板孔径

3-4u

0.5u

5-20u

2u

F、探测器漏液

道理

束缚法子

、贯通池垫片毁坏

、a、防备过大的靠山压力(压力降)

b、改换垫片

2、贯通池窗击碎

2、改换窗口

3、手紧讨论漏液

3、拧紧或改换

4、废液管壅塞

4、改换废液管

5、贯通池壅塞

5、从头装配或改换

3

液相色谱系统的很多题目都能在谱图上相应出来。个中有一些题目能够经过转变设立参数获得束缚;而其余的题目务必经过修正操纵程序来束缚。关于色谱柱和震动相的确实筛选是获得好的色谱图的关键。

A、峰拖尾

道理

束缚法子

、筛板壅塞

、a、反冲色谱柱

b、改换出口筛板

c、改换色谱柱

2、色谱柱陷落

2、填充色谱柱

3、搅扰峰

3、a、哄骗更长的色谱柱

b、转变震动相或改换色谱柱

4、震动相PH筛选差错

4、调动PH值。关于碱性化合物,低PH值更有益于获得对称峰

5、样本与填料表面的融化点产生相应

5、a、插足离子对试剂或碱性挥发性妆点剂

b、改动色谱柱

B、峰前延

道理

束缚法子

、柱温低

、抬高柱温

2、样本溶剂筛选不妥当

2、哄骗震动相做为样本溶剂

3、样本过载

3、低沉样本含量

4、色谱柱毁坏

4、见A、A2

C、峰分叉

道理

束缚法子

、守护柱或剖析柱混浊

、取下守护柱再举行剖析。要是需求改换守护柱。要是剖析柱壅塞,拆下来洗濯。要是题目依然存在,或许是柱子被强保存物资混浊,哄骗合适的复活办法。要是题目依然存在,出口或许被壅塞,改换筛板或改换色谱柱。

2、样本溶剂不溶于震动相

2、转变样本溶剂。要是或许采纳震动相做为样本溶剂。

D、峰变形

道理

束缚法子

、样本过载

、裁减样本载量

E、早出的峰变形

道理

束缚法子

、样本溶剂筛选不妥当

、a、裁减进样体积

b、哄骗低极性样本溶剂

F、早出的峰拖尾水平大于晚出的峰

道理

束缚法子

、柱外效应

、a、调动系统相连(哄骗更短、内径更小的管路)

b、哄骗小体积的贯通池

G、K’增多时,脱尾更严峻

道理

束缚法子

、二级保存效应,反相形式

、a、插足三乙胺(或碱性样本)

b、插足乙酸(或酸性样本)

c、插足盐或缓冲剂(或离子化样本)

d、改换一支撑子

2、二级保存效应,正相形式

2、a、插足三乙胺(或碱性样本)

b、插足乙酸(或酸性样本)

c、插足水(或多官能团化合物)

d、试用另一种法子

3、二级保存效应,离子对

3、插足三乙胺(或碱性样本)

H、酸性或碱性化合物的峰拖尾

道理

束缚法子

、缓冲不符合

、a、哄骗浓度50-00mM的缓冲液

b、哄骗Pka即是震动相PH值的缓冲液

I、额外的峰

道理

束缚法子

、样本中有其余组份

、寻常

2、前一次进样的洗脱峰

2、a、增多运转工夫或梯度斜率

b、抬高流速

3、空位或鬼峰

3、a、查看震动相能否洁净

b、哄骗震动相做为样本溶剂

c、裁减进样体积

J、保存工夫摇荡

道理

束缚法子

、温控失当

、调好柱温

2、震动相组分转变

2、防备转变(挥发、相应等)

3、色谱柱没有均衡

3、在每一次运转以前赋予充实的工夫均衡色谱柱

K、保存工夫陆续转变

道理

束缚法子

、流速转变

、从头设定流速

2、泵中有气泡

2、从泵中撤除气泡

3、震动相筛选不妥当

3、a、改换符合的震动相

b、筛选符合的搀杂震动相

L、基线漂移

道理

束缚法子

、柱温摇荡。(纵使是很小的温度转变都市引发基线的摇荡。常常影响示差探测器、电导探测器、较低锐敏度的紫外探测器或另外光电类探测器。)

、遏制好柱子和震动相的温度,在探测器以前哄骗热相易器

2、震动相不平匀。(震动相前提转变引发的基线漂移大于温度致使的漂移。)

2、哄骗HPLC级的溶剂,高纯度的盐和增加剂。震动相在哄骗行举行脱气,哄骗中哄骗氦气。

3、贯通池被混浊或有气体

3、用甲醇或其余强极性溶剂冲刷贯通池。倘有需求,能够用N的硝酸。(不要用盐酸)

4、探测器出口壅塞。(高压形成贯通池窗口分裂,形成噪音基线)

4、掏出壅塞物或改换管子。参考探测器手册改换贯通池窗。

5、震动相配比失当或流速转变

5、改动配比或流速。为防备这个题目可按期查看震动相构成及流速。

6、柱均衡慢,格外是震动相产生转变时

6、用中等强度的溶剂举行冲刷,改动震动相时,在剖析前用0-20倍体积的新震动相对柱子举行冲刷。

7、震动相混浊、蜕变或由下德行溶剂配成

7、查看震动相的构成。哄骗高德行的化学试剂及HPLC级的溶剂

8、样本中有强保存的物资(高K’值)以馒头峰样被洗脱出,进而展现出一个逐渐抬高的基线。

8、哄骗守护柱,倘有需求,在进样之偶尔在剖析历程中,按期用强溶剂冲刷柱子。

9、哄骗轮回溶剂,但探测器未调动。

9、从头设定基线。当探测器动力学界限产生转变时,哄骗新的震动相。

0、探测器没有设定在最大汲取波甜头。

0、将波长调动至最大汲取波甜头

M、基线噪音(规矩的)

道理

束缚法子

、在震动相、探测器或泵中有空气

、震动相脱气。冲刷系统以撤除探测器或泵中的空气。

2、漏液

2、见第三部份。查看管路讨论能否松动,泵能否漏液,能否有盐析出和不寻常的噪音。倘有需求,改换泵密封。

3、震动相搀杂不全部

3、用手摇荡使搀杂平匀或哄骗低粘度的溶剂

4、温度影响(柱温太高,探测器未加热)

4、裁减不同或加之热相易器

5、在统一条线上有其余电子设立

5、断开LC、探测器和纪录仪,查看搅扰能否来自于外部,加以更改。

6、泵振荡

6、在系统中插足脉冲阻尼器

N、基线噪音(不规矩的)

道理

束缚法子

、漏液

、见第三部份。查看讨论能否松动,泵能否漏液,能否有盐析出和不寻常的噪音。倘有需求,改换密封。查看贯通池能否漏液。

2、震动相混浊、蜕变或由低质溶剂配成

2、查看震动相的构成。

3、震动相各溶剂不相溶

3、筛选互溶的震动相

4、探测器/纪录仪电子元件的题目

4、断开探测器和纪录仪的电源,查看并更改。

5、系统内有气泡

5、用强极性溶液洗濯系统

6、探测器内有气泡

6、洗濯探测器,在探测器反面装配靠山压力调动器

7、贯通池混浊(纵使是一些的混浊物也会形成噪音。)

7、用N的硝酸(不能用磷酸)洗濯贯通池

8、探测器灯能量不够

8、改换灯

9、色谱柱填料散失或壅塞

9、改换色谱柱

0、震动相搀杂不平匀或搀杂器处事不寻常

0、修理或改换搀杂器,在震动相不走梯度时,倡导不哄骗泵的搀杂安设

O、宽峰

道理

束缚法子

、震动相构成转变

、从头制备新的震动相

2、震动相流速过低

2、调动流速

3、漏液(格外是在柱子和探测器之间)

3、见section3。查看讨论能否松动、泵能否漏液、能否有盐析出以及不寻常的噪音。要是需求改换密封。

4、探测器设定不确实

4、调动设定

5、柱外效应影响

a、柱子过载

b、探测器对反适工夫或池体积相应过大

c、柱子与探测器之间的管路过长或管路内径太大

d、纪录仪响适工夫过长

5、

a、小体积进样(比如:0ul而不是00ul)以:0或:00的比例稀释样本

b、裁减响适工夫或哄骗更小的贯通池

c、哄骗内径为0.-0.0的短管路

d、裁减响适工夫

6、缓冲液浓度过低

6、增多浓度

7、守护柱混浊或生效

7、改换守护柱

8、色谱柱混浊或生效,塔板数较低

8、改换一样范例的色谱柱。要是新柱子能够供给对称的色谱峰,则用强溶剂冲刷旧柱子。

9、柱出口陷落

9、翻开柱出口,填补陷落或改换柱子

0、显露两个或多个未被全部分散的物资的峰

0、筛选另外范例的色谱柱以改观分散结果

、柱温过低

、抬高柱温。除非非凡情状,温度不宜超出75℃

2、探测器工夫常数太大

2、哄骗较小的工夫常数

P、分散度低沉

道理

束缚法子

、震动相混浊或蜕变(引发保存工夫转变)

、从头摆设震动相

2、守护柱或剖析柱壅塞

2、去掉守护柱举行剖析。要是需求则改换守护柱。要是剖析柱壅塞,可举行反冲。要是题目依然存在色谱柱或许被强保存的混浊物毁坏,倡导哄骗妥当的复活程序。要是题目依然存在,出口或许壅塞了,改换出口处的筛板或改换色谱柱。

Q、全部的峰面积都过小

道理

束缚法子

、探测器衰减设定太高

、裁减衰减的设定

2、探测器工夫常数设定太大

2、设定较小的工夫常数

3、进样量太少

3、增猛进样量

4、纪录仪相连失当

4、哄骗确实的相连

R、全部的峰面积都太大

道理

束缚法子

、探测器衰减设定过低

、采纳较大的衰减

2、进样过量

2、裁减进样量

3、纪录仪相连不确实

3、确实相连纪录仪

4

如下题目在哄骗进样阀历程中有或许产生。

A、手动进样阀,转嫁不灵

道理

束缚法子

、转子密封毁坏

、改换或调动转子密封

2、转子太紧

2、调动转子的松紧度

B、手动进样阀,载样困苦

道理

束缚法子

、进样阀装配失当

、从头装配

2、定量环壅塞

2、洗濯或改换定量环

3、进样器混浊

3、洗濯或改换进样器

4、管路壅塞

4、洗濯或改换管路

C、主动进样阀,不能转嫁

道理

束缚法子

、无压力(或电源)

、供给妥当的压力(电源)

2、转子太紧

2、调动转子的松紧度

3、进样阀装配失当

3、从头装配

D、主动进样阀,另外题目

道理

束缚法子

、壅塞

、洗濯或改换壅塞部件

2、机器阻碍

2、见随机修理手册

3、遏制器阻碍

3、修理或改换遏制器

5由气息、景色和声响能够觉察的题目,你需求哄骗你全部的感官去觉察液相色谱的题目。你最佳养成习惯,天天花上几分钟哄骗你的感官(除了味觉)来“感触”你的液相色谱能否存在题目,如许能够辅助你快速找到题目地点。比如:在你看到漏液以前,你或许首先闻到它的气息。大部份的题目是能够经过眼睛看到。A、溶剂的气息

道理

束缚法子

、漏液

、见section3

2、溅出

2、a、查看废液瓶能否已满

b、找到溅出的部位并洗濯洁白

B、热气息

道理

束缚法子

、仪器过热

、a、查看并调动透风设备

b、查看并调动温度设定

c、关掉仪器,搜索修理手册

C、读数不寻常

道理

束缚法子

、压力不寻常

、见section2

2、柱温箱题目

2、

a、查看并调动设定

b、参照用户手册

3、探测器灯生效

3、改换灯

D、灯告诫

道理

束缚法子

、压力超出极限值

a、查看能否壅塞

b、查看并调动极限值的设定

2、另外启示灯

2、见用户手册

E、告诫音

道理

束缚法子

、溶剂走漏/溅出

、找到并束缚

2、另外告诫音

2、见用户手册

F、忤耳的短音或长音

道理

束缚法子

、轴承生效

、见用户手册

2、光滑不够

2、举行妥当的光滑

3、机器阻碍

3、见用户手册

6

罕见阻碍及平时维持

下表中列出了液相色谱罕见的一些题目,右边中则列出的平时维持的法子能够裁减题目呈现的频次。括号中的数字是倡导举行维持的工夫断绝。用户手册则供给您更多的维持法子。

溶剂瓶

题目

维持

、出口筛板壅塞

a、改换(3-6个月)

b、过滤震动相,0.5u滤膜

2、气泡

2、震动相脱气

题目

维持

、气泡

、震动相脱气

2、泵密封毁坏

2、改换(3个月)

3、单向阀毁坏

3、过滤震动相,哄骗在线过滤,打算备用单向阀

进样阀

题目

维持

、转子密封毁坏

a、不要拧的过紧

b、过滤样本

色谱柱

题目

维持

、筛板壅塞

、a、过滤震动相

b、过滤样本

c、哄骗在线过滤或守护柱

2、柱头陷落

2、a、防备哄骗PH8的震动相(针对大部份硅胶的柱子)

b、哄骗守护柱

c、哄骗预柱(饱和色谱柱)

探测器

题目

维持

、灯生效,探测器相应低沉,噪音增大

、改换(6个月)或打算备用灯

2、贯通池有气泡

2、a、维持贯通池明净

b、池后哄骗反压统制器

c、震动相脱气

通常

题目

维持

、侵蚀/冲突毁坏

、在不使历时维持系统缓冲液的明净

文章起源于培优革新方剂研发与一致性评估,转载只为分享学问,倘有侵权请联络省略。

增加

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