仪器高效液相色谱常见问题与解决方法汇

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点击上方蓝字   压力反常

职掌压力的变动时常是毛病的前兆。从下表中找出所察看到的形势,并在右边的列表中参考相应的办理办法。

A、没有压力显示,没有固定相固定

因为

办理办法

、电源题目

、接通电源,开机

2、保障丝被烧坏

2、替换保障丝

3、管束器设定不切确或设定失利

3、a、选取妥当的设定

b、修理或替换管束器

4、柱塞杆折断

4、替换柱塞杆

5、泵头内有空气

5、溶剂脱气、启动泵抽出空气

6、固定相不够

6、a、增长固定相

b、替换出口滤头

7、单向阀毁坏

7、替换单向阀

8、漏液

8、拧紧或替换手紧磋议

B、固定相固定平常,但没有压力显示

因为

办理办法

、风度毁坏

、替换风度

2、压力传感器毁坏

2、替换压力传感器

C、压力接连偏高

因为

办理办法

、流速设定太高

、调动流速设定

2、柱前筛板淤塞

2、a、在同意处境下反冲色谱柱

b、替换筛板

c、替换色谱柱

3、固定相运用不妥或缓冲盐的结晶沉没

3、a、运用妥当的固定相

b、洗濯色谱柱

4、色谱柱取舍不妥

4、取舍妥当的色谱柱

5、进样阀毁坏

5、冲洗或替换进样阀

6、柱温过低

6、升高温度

7、管束器反常

7、修理或替换管束器

8、掩护柱障碍

8、冲洗或替换掩护柱

9、在线过滤器障碍

9、冲洗或替换在线过滤器

D、压力接连偏低

因为

办理办法

、流速设定过低

、调动流速

2、系统漏液

2、断定漏液地位并修理

3、色谱柱取舍不妥

3、取舍妥当的色谱柱

4、柱温太高

4、低沉温度

5、管束器反常

5、修理或替换管束器

E、压力不停高涨

因为

办理办法

、见列表C

、见列表C

F、压力降为零

因为

办理办法

、见列表A、B

、见列表A、B

G、压力不停下落,但不回零

因为

办理办法

、见列表D

、见列表D

H、压力摇曳

因为

办理办法

、泵中有气体

、a、溶剂脱气

b、从泵中撤退气体

2、单向阀毁坏

2、替换单向阀

3、泵密封毁坏

3、替换泵密封

4、脱气不充足

4、a、溶剂脱气

b、变换脱气办法(运用在线脱气法等)

5、系统漏液

5、断定漏液地位并修理

6、运用梯度洗脱

6、由于固定相粘度的变动引发的压力摇曳

2

漏液

时常也许经过拧紧或替换管路磋议来办理漏液的题目。但值得仔细的是过份拧紧会致使金属磋议的漏液和塑料磋议的磨损。假设经过轻微拧紧磋议不能办理漏液的题目,就一定将磋议取下,审查是不是毁坏(譬喻,卡套毁坏、密封表面有杂质);毁坏的磋议该当替换掉。

A、磋议处漏液

因为

办理办法

、磋议松动

、拧紧

2、磋议磨损

2、替换

3、磋议过紧

3、a、拧松,再从新拧紧

b、替换

4、磋议被玷污

4、a、拆下冲洗

b、替换

5、部件不般配

5、运用统一品牌的配件

B、泵漏液

因为

办理办法

、单向阀松动

、a、拧紧单向阀(不用拧的过紧)

b、替换单向阀

2、磋议松动

2、拧紧磋议(不用拧的过紧)

3、搀杂器密封毁坏

3、a、替换搀杂器密封

b、替换搀杂器

4、泵密封毁坏

4、修理或替换泵密封件

5、压力传感器毁坏

5、修理或替换压力传感器

6、脉冲阻尼器毁坏

6、替换脉冲阻尼器

7、比例阀毁坏

7、a、审查隔阂,假设漏液立刻替换

b、审查手紧磋议,毁坏的立刻替换

8、放空阀的毁坏

8、a、拧紧放空阀

b、替换放空阀

C、进样阀漏液

因为

办理办法

、转子密封毁坏

、从新装配或替换进样阀

2、定量环障碍

2、替换定量环

3、进样口密封松动

3、调动

4、进样针头尺寸不适宜

4、运用妥当的进样针

5、废液管中形成虹吸

5、维持废液管高于废液液面

6、废液管障碍

6、替换或疏通废液管

D、色谱柱漏液

因为

办理办法

、尾端磋议松动

、拧紧磋议

2、卡套内有填料

2、拆下、冲洗卡套、从新装配

3、筛板厚度不适宜

3、运用适宜的筛板(参考下表)

E、筛板取舍引导

物资粒径

筛板孔径

3-4u

0.5u

5-20u

2u

F、探测器漏液

因为

办理办法

、畅达池垫片毁坏

、a、避让过大的配景压力(压力降)

b、替换垫片

2、畅达池窗击碎

2、替换窗口

3、手紧磋议漏液

3、拧紧或替换

4、废液管障碍

4、替换废液管

5、畅达池障碍

5、从新装配或替换

3

液相色谱系统的很多题目都能在谱图上反响出来。此中有一些题目也许经过变换设置参数获得办理;而其余的题目一定经过窜改职掌程序来办理。关于色谱柱和固定相的切确取舍是获得好的色谱图的关键。

A、峰拖尾

因为

办理办法

、筛板障碍

、a、反冲色谱柱

b、替换出口筛板

c、替换色谱柱

2、色谱柱陷落

2、填充色谱柱

3、干预峰

3、a、运用更长的色谱柱

b、变换固定相或替换色谱柱

4、固定相PH取舍过错

4、调动PH值。关于碱性化合物,低PH值更有益于获得对称峰

5、样本与填料表面的融化点产生反响

5、a、插手离子对试剂或碱性挥发性润饰剂

b、更始色谱柱

B、峰前延

因为

办理办法

、柱温低

、抬高柱温

2、样本溶剂取舍不妥当

2、运用固定相做为样本溶剂

3、样本过载

3、低沉样本含量

4、色谱柱毁坏

4、见A、A2

C、峰分叉

因为

办理办法

、掩护柱或解析柱玷污

、取下掩护柱再举办解析。假设需求替换掩护柱。假设解析柱障碍,拆下来冲洗。假设题目仍旧存在,或者是柱子被强保存物资玷污,袭用妥当的更生办法。假设题目仍旧存在,出口或者被障碍,替换筛板或替换色谱柱。

2、样本溶剂不溶于固定相

2、变换样本溶剂。假设或者选取固定相做为样本溶剂。

D、峰变形

因为

办理办法

、样本过载

、削减样本载量

E、早出的峰变形

因为

办理办法

、样本溶剂取舍不妥当

、a、削减进样体积

b、袭用低极性样本溶剂

F、早出的峰拖尾水平大于晚出的峰

因为

办理办法

、柱外效应

、a、调动系统毗邻(运用更短、内径更小的管路)

b、运用小体积的畅达池

G、K’增长时,脱尾更严峻

因为

办理办法

、二级保存效应,反相形式

、a、插手三乙胺(或碱性样本)

b、插手乙酸(或酸性样本)

c、插手盐或缓冲剂(或离子化样本)

d、替换一支撑子

2、二级保存效应,正相形式

2、a、插手三乙胺(或碱性样本)

b、插手乙酸(或酸性样本)

c、插手水(或多官能团化合物)

d、试用另一种办法

3、二级保存效应,离子对

3、插手三乙胺(或碱性样本)

H、酸性或碱性化合物的峰拖尾

因为

办理办法

、缓冲不适宜

、a、运用浓度50-00mM的缓冲液

b、运用Pka即是固定相PH值的缓冲液

I、额外的峰

因为

办理办法

、样本中有其余组份

、平常

2、前一次进样的洗脱峰

2、a、增长运转时候或梯度斜率

b、升高流速

3、空位或鬼峰

3、a、审查固定相是不是纯朴

b、运用固定相做为样本溶剂

c、削减进样体积

J、保存时候摇曳

因为

办理办法

、温控不妥

、调好柱温

2、固定相组分变动

2、避让变动(挥发、反响等)

3、色谱柱没有均衡

3、在每一次运转以前予以充裕的时候均衡色谱柱

K、保存时候不停变动

因为

办理办法

、流速变动

、从新设定流速

2、泵中有气泡

2、从泵中撤退气泡

3、固定相取舍不妥当

3、a、替换适宜的固定相

b、取舍适宜的搀杂固定相

L、基线漂移

因为

办理办法

、柱温摇曳。(尽管是很小的温度变动都邑引发基线的摇曳。时常影响示差探测器、电导探测器、较低活络度的紫外探测器或别的光电类探测器。)

、管束好柱子和固定相的温度,在探测器以前运用热互换器

2、固定相不匀称。(固定相前提变动引发的基线漂移大于温度致使的漂移。)

2、运用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和增加剂。固定相在运用行举办脱气,运用中运用氦气。

3、畅达池被玷污或有气体

3、用甲醇或其余强极性溶剂洗濯畅达池。若有需求,也许用N的硝酸。(不要用盐酸)

4、探测器出口障碍。(高压形成畅达池窗口分解,形成噪音基线)

4、掏出障碍物或替换管子。参考探测器手册替换畅达池窗。

5、固定相配比不妥或流速变动

5、更始配比或流速。为避让这个题目可按期审查固定相构成及流速。

6、柱均衡慢,非常是固定相产生变动时

6、用中等强度的溶剂举办洗濯,更始固定相时,在解析前用0-20倍体积的新固定相对柱子举办洗濯。

7、固定相玷污、变换或由下德行溶剂配成

7、审查固定相的构成。运用高德行的化学试剂及HPLC级的溶剂

8、样本中有强保存的物资(高K’值)以馒头峰样被洗脱出,进而显露出一个慢慢抬高的基线。

8、运用掩护柱,若有需求,在进样之偶尔在解析流程中,按期用强溶剂洗濯柱子。

9、运用轮回溶剂,但探测器未调动。

9、从新设定基线。当探测器动力学规模产生变动时,运用新的固定相。

0、探测器没有设定在最大汲取波所长。

0、将波长调动至最大汲取波所长

M、基线噪音(法则的)

因为

办理办法

、在固定相、探测器或泵中有空气

、固定相脱气。洗濯系统以撤退探测器或泵中的空气。

2、漏液

2、见第三部份。审查管路磋议是不是松动,泵是不是漏液,是不是有盐析出和不平常的噪音。若有需求,替换泵密封。

3、固定相搀杂不齐全

3、用手摇曳使搀杂匀称或运用低粘度的溶剂

4、温度影响(柱温太高,探测器未加热)

4、削减差别或加之热互换器

5、在统一条线上有其余电子设置

5、断开LC、探测器和纪录仪,审查干预是不是来自于外部,加以校对。

6、泵振荡

6、在系统中插手脉冲阻尼器

N、基线噪音(不法则的)

因为

办理办法

、漏液

、见第三部份。审查磋议是不是松动,泵是不是漏液,是不是有盐析出和不平常的噪音。若有需求,替换密封。审查畅达池是不是漏液。

2、固定相玷污、变换或由低质溶剂配成

2、审查固定相的构成。

3、固定相各溶剂不相溶

3、取舍互溶的固定相

4、探测器/纪录仪电子元件的题目

4、断开探测器和纪录仪的电源,审查并校对。

5、系统内有气泡

5、用强极性溶液冲洗系统

6、探测器内有气泡

6、冲洗探测器,在探测器背面装配配景压力调动器

7、畅达池玷污(尽管是少许的玷污物也会形成噪音。)

7、用N的硝酸(不能用磷酸)冲洗畅达池

8、探测器灯能量不够

8、替换灯

9、色谱柱填料散失或障碍

9、替换色谱柱

0、固定相搀杂不匀称或搀杂器劳动不平常

0、修理或替换搀杂器,在固定相不走梯度时,提议不运用泵的搀杂安设

O、宽峰

因为

办理办法

、固定相构成变动

、从新制备新的固定相

2、固定相流速过低

2、调动流速

3、漏液(非常是在柱子和探测器之间)

3、见section3。审查磋议是不是松动、泵是不是漏液、是不是有盐析出以及不平常的噪音。假设需求替换密封。

4、探测器设定不切确

4、调动设定

5、柱外效应影响

a、柱子过载

b、探测器对反当令偶尔池体积相应过大

c、柱子与探测器之间的管路过长或管路内径太大

d、纪录仪响当令间过长

5、

a、小体积进样(譬喻:0ul而不是00ul)以:0或:00的比例稀释样本

b、削减响当令偶尔运用更小的畅达池

c、运用内径为0.-0.0的短管路

d、削减响当令间

6、缓冲液浓度过低

6、增长浓度

7、掩护柱玷污或做废

7、替换掩护柱

8、色谱柱玷污或做废,塔板数较低

8、替换一样范例的色谱柱。假设新柱子也许供给对称的色谱峰,则用强溶剂洗濯旧柱子。

9、柱出口陷落

9、翻开柱出口,填补陷落或替换柱子

0、显露两个或多个未被齐全分别的物资的峰

0、取舍别的范例的色谱柱以改观分别功效

、柱温过低

、升高柱温。除非非常处境,温度不宜超越75℃

2、探测器时候常数太大

2、运用较小的时候常数

P、分别度低沉

因为

办理办法

、固定相玷污或变换(引发保存时候变动)

、从新设置固定相

2、掩护柱或解析柱障碍

2、去掉掩护柱举办解析。假设需求则替换掩护柱。假设解析柱障碍,可举办反冲。假设题目仍旧存在色谱柱或者被强保存的玷污物毁坏,提议运用妥当的更生程序。假设题目仍旧存在,出口或者障碍了,替换出口处的筛板或替换色谱柱。

Q、全部的峰面积都过小

因为

办理办法

、探测器衰减设定太高

、削减衰减的设定

2、探测器时候常数设定太大

2、设定较小的时候常数

3、进样量太少

3、增猛进样量

4、纪录仪毗邻不妥

4、运用切确的毗邻

R、全部的峰面积都太大

因为

办理办法

、探测器衰减设定过低

、选取较大的衰减

2、进样过量

2、削减进样量

3、纪录仪毗邻不切确

3、切确毗邻纪录仪

4

如下题目在运用进样阀流程中有或者产生。

A、手动进样阀,转化不灵

因为

办理办法

、转子密封毁坏

、替换或调动转子密封

2、转子太紧

2、调动转子的松紧度

B、手动进样阀,载样难题

因为

办理办法

、进样阀装配不妥

、从新装配

2、定量环障碍

2、冲洗或替换定量环

3、进样器玷污

3、冲洗或替换进样器

4、管路障碍

4、冲洗或替换管路

C、主动进样阀,不能转化

因为

办理办法

、无压力(或电源)

、供给妥当的压力(电源)

2、转子太紧

2、调动转子的松紧度

3、进样阀装配不妥

3、从新装配

D、主动进样阀,别的题目

因为

办理办法

、障碍

、冲洗或替换障碍部件

2、呆板毛病

2、见随机修理手册

3、管束器毛病

3、修理或替换管束器

5由气息、光景和声响也许发觉的题目,你需求袭用你全部的感官去发觉液相色谱的题目。你最佳养成习惯,天天花上几分钟袭用你的感官(除了味觉)来“发觉”你的液相色谱是不是存在题目,云云也许协助你火速找到题目地点。譬喻:在你看到漏液以前,你或者首先闻到它的气息。大部份的题目是也许经过眼睛看到。A、溶剂的气息

因为

办理办法

、漏液

、见section3

2、溅出

2、a、审查废液瓶是不是已满

b、找到溅出的部位并冲洗纯洁

B、热气息

因为

办理办法

、仪器过热

、a、审查并调动透风设备

b、审查并调动温度设定

c、关掉仪器,搜索修理手册

C、读数不平常

因为

办理办法

、压力不平常

、见section2

2、柱温箱题目

2、

a、审查并调动设定

b、参照用户手册

3、探测器灯做废

3、替换灯

D、灯告诫

因为

办理办法

、压力超越极限值

a、审查是不是障碍

b、审查并调动极限值的设定

2、别的启示灯

2、见用户手册

E、告诫音

因为

办理办法

、溶剂泄露/溅出

、找到并办理

2、别的告诫音

2、见用户手册

F、难听的短音或长音

因为

办理办法

、轴承做废

、见用户手册

2、光滑不敷

2、举办妥当的光滑

3、呆板毛病

3、见用户手册

6

罕见毛病及平日维持

下表中列出了液相色谱罕见的一些题目,右边中则列出的平日维持的办法也许削减题目涌现的频次。括号中的数字是提议举办维持的时候距离。用户手册则供给您更多的维持办法。

溶剂瓶

题目

维持

、出口筛板障碍

a、替换(3-6个月)

b、过滤固定相,0.5u滤膜

2、气泡

2、固定相脱气

题目

维持

、气泡

、固定相脱气

2、泵密封毁坏

2、替换(3个月)

3、单向阀毁坏

3、过滤固定相,袭用在线过滤,筹备备用单向阀

进样阀

题目

维持

、转子密封毁坏

a、不要拧的过紧

b、过滤样本

色谱柱

题目

维持

、筛板障碍

、a、过滤固定相

b、过滤样本

c、袭用在线过滤或掩护柱

2、柱头陷落

2、a、避让运用PH8的固定相(针对大部份硅胶的柱子)

b、运用掩护柱

c、运用预柱(饱和色谱柱)

探测器

题目

维持

、灯做废,探测器相应低沉,噪音增大

、替换(6个月)或筹备备用灯

2、畅达池有气泡

2、a、维持畅达池纯洁

b、池后运用反压按捺器

c、固定相脱气

普遍

题目

维持

、腐化/争持毁坏

、在不使历时维持系统缓冲液的纯洁

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