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今日为众人筹办的干货常识是关联仪器维持与调养的，一起来看看吧！
平常维持篇（1）
输12
1．HPLC的平常操纵前提
温度：10至30℃；相对湿度＜80％；最佳是恒温、恒湿，离开高电烦扰、高震荡设立。
2．泵的调养（1）哄骗固定相尽管要洁净；（2）进液处的沙芯过滤头要通常洗濯；（3）固定订换取时要避让沉没；（4）避让泵内梗塞或有气泡;
3．进样器的调养屡屡解析完成后，要屡次洗濯进样口，避让样本的交错浑浊；
4．柱的调养（1）柱子在职何情景下不能碰撞、曲折或剧烈晃荡；（2）当柱子和色谱仪连合时，阀件或管路必然要洗濯纯洁；（3）要留神固定相的脱气；（4）避让哄骗高粘度的溶剂做为固定相；（5）进样样本要提纯；（6）严刻掌握进样量；（7）天天解析做事完成后，要洗濯进样阀中残留的样本；（8）天天解析测定完成后，都要用合适的溶剂来洗濯柱；（9）若解析柱永久不哄骗，应用合适有机溶剂保存并紧闭。
5．探测器(UV)的调养（1）紫外灯的调养：在解析前、柱均衡得差未几时，翻开探测器；在解析结尾后，立时合拢探测器。（2）样本池要调养。
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平常维持篇（2）
1、泵压不稳
（1）泵头有气泡——固定相脱气/大流量洗濯泵/用打针器抽取固定动相
（2）单向阀毛病——洗濯
若上述操纵仍不能束缚，可用异丙醇洗濯固定（无色谱柱洗濯，由手动进样器直接进探测器），流量为3-4ml/min,洗濯50分钟左右，而后从新安置色谱柱，退换固定相均衡，如斯再不能束缚泵压摇摆毛病，可请求退换配件。
2、缓冲盐的哄骗
固定相含有盐分时，做完试验后必然要举办流路洗濯。
◇首先用水洗濯，翻开排液阀用PURG键变换出原有含盐的固定相，而后合拢排液阀翻开泵洗濯整个流路45分钟以上，如斯退换固定相为水和甲醇搀杂液洗濯整个流路30分钟（此环节时时可省去，遵循试验而论），着末退换纯甲醇洗濯整个流路45分钟以上。
◇泵头洗濯：
用备件中的针头和针管别离用蒸馏水和纯甲醇洗濯3-5ml。
如固定相不含盐，可对呆板按期举办简明的洗濯维持，遵循试验几何而定。
◇手动进样器洗濯：
相同用备件中的针管和专用洗濯针头敌手动进样器的承载形态和进样形态别离举办洗濯3-4ml的蒸馏水，而后再洗濯3-4ml的纯甲醇。
保证屡屡做完试验，全数流路中满盈纯甲醇！
3、色谱的调养
C18柱绝对不能进卵白样本、血样，生物样本。
要留神柱子的PH值规模，不得打针强酸强碱的样本，特别是碱性样本。
万古间不必仪器，理当将柱子取上用堵头封好保存，留神不能用纯水保存柱子，而理当用有机相（如甲醇）保存，由于纯水易长霉。
4、流路梗塞题目
梗塞致使压力太大，按预柱→搀杂器中的过滤器→管途经滤器→单向阀检讨，并洗濯。洗濯办法：①以民丙醇做溶剂洗濯②放在异丙醇中超声波洗濯③用10%稀硝酸洗濯。
平常维持篇（3）
输12
1、固定相的抽做请求
高效液相级色谱醇，二次蒸馏水，缓冲盐必然要过滤；
固定相脱气相当要紧（可采纳抽滤，超声波脱气等办法）
2、吸滤头
特别情景下可拆下滤头抽取以判定个中能否梗塞；亦可用打针器汲取固定沟通过吸滤头打出以判定其能否梗塞。如有梗塞情景可用异丙醇超声波洗濯；洗濯弗胜利则需求退换。
3、单向阀
如遭遇泵压不稳或固定相不能抽取，则也许是单向阀涌现题目，脱掉用异丙醇超声波洗濯，洗濯时须按其安置的方位安插在小烧杯中，谨记弗成与安置方位颠倒超洗！
4、泵头
泵头漏液或涌现其余毛病时时要请求修理（如漏液，或退换柱塞杆及其密封垫等）
5、过滤器
当色谱峰涌现反常情景时，有也许是此部件被浑浊，拆下用异丙醇超洗或退换过滤垫片。
6、排液阀
此处不能齐备密封或漏液时时时是个中的垫片浑浊或磨损，可脱掉后掏出其垫片用异丙醇超声波洗濯或退换垫圈。
7、手动进样器
常常应留神用二次蒸馏水和甲醇在承载形态及进样解析形态洗濯；如涌现漏液表象，缘故极也许为转子密封垫磨损或浑浊，时时须请求修理或退换配件。
8、畅达池
在色谱峰不寻常时会也许是此部件补浑浊。可拆卸后掏出个中的垫片用异丙醇超洗（可遵循讲解书举办操纵或请求修理）。
9、做事站
涌现死机可重起谋略机；不寻常运转时，首先可退换电脑测试其硬件毛病；或在本机上从新插拔接口、从新安置软件。
何如取舍掩护柱？
输12
何如取舍掩护柱，但又不影响别离解析？常常，在取舍掩护柱以前首先要琢磨的是样本能否洁净，关于大部份解析做事者来讲，一只1cm长的掩护柱便能供应充足的掩护影响。然而，纵然样本特别不洁净，或做事中发觉通常要退换1cm的掩护柱，那末就理当采用2cm或3cm的掩护柱，掩护柱越长果然所装填的色谱填料就越多，则其掩护功能越好，固然跟着掩护柱长度的增进，样本的保存时候也呼应增进，时时来讲，掩护柱的内径与解析色谱柱的内径类似或相立刻可。
掩护柱的填料装填方法也很要紧，当前有薄膜装填法的掩护柱，哄骗通过简药便利，并且也许在试验室中举办干装。然而，其最大的毛病是不经济，特别是针对华夏的详细情景，一次性哄骗相对花费较高。其它，薄膜装填法的掩护柱所装填的色谱填料有限，只可供应很有限的掩护影响；不过也由于所装填的色谱填料较少，掩护柱的长度也较短，是以对解析样本的保存时候的影响也很小。
另一种掩护柱组织原来践是淘汰了色谱解析柱，策画方法上有直连式/手紧式或齐备式。齐备式策画是由色谱柱的临盆厂商直接安置在色谱解析柱上的，必需与色谱解析柱一起定货，也许特别便利的哄骗，但不能被批改。直连式组织策画也许在职何时候由色谱做事者来安置联接，也许与任何品牌的色谱柱联接哄骗，并且也许遵循不同的样本取舍适宜的掩护柱长度。手紧式掩护柱从组织上讲是与直连式掩护柱相同，然则在联接时不必借助扳手等用具，直接用手上紧便可。其它从掩护柱组织的角度看，掩护柱组织又分为能否也许退换掩护柱柱芯，此刻大多半的掩护柱均也许退换柱芯，也许低落掩护柱的哄骗成本。
大多半人是遵循色谱解析柱的填料来取舍掩护柱的填料，寻常情景下也许取舍与解析色谱柱相同的色谱填料。然而，遵循现实的解析做事，也可不必与解析色谱柱的填料齐备般配。
关于取舍掩护柱的准绳是：在满意别离解析请求的前提前提下，尽也许的取舍较短的掩护柱，尽也许取舍对别离样本小一些保存性的填料。
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HPLC毛病及清除办法
1、保存时候变动（1）柱温变动：柱恒温；（2）等度与梯度间未能充足均衡：最少用10倍柱体积的固定相均衡柱（3）缓冲液容量不够：用25mmol/L的缓冲液（4）柱浑浊：天天洗濯柱（5）柱内前提变动：不乱进样前提,调治固定相（6）柱快到达寿命：采纳掩护柱2、保存时候淘汰（1）流速增进：检讨泵,从新设定流速（2）样本超载：低落样本量（3）键合相散失：固定相PH值维持在3~7.5检讨柱的方位（4）固定相构成变动：避让固定相挥发或沉没（5）温度增进：柱恒温3、保存时候伸长1.流速降落：管路暴露,退换泵密封圈,清除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变动：用固定相改性剂,如加三乙胺,或采纳碱至钝化柱3.键合相散失：同前2（3）4.固定相构成变动：同前2（4）5.温度低落：同前2（5）4、涌现肩峰或分叉（1）样本体积过大：用固定相配样,总的样本体积小于第一峰的15%（2）样本溶剂过强：采纳较弱的样本溶剂（3）柱陷落或造成短路通道：退换色谱柱,采纳较弱腐化性前提（4）柱内烧结不锈钢做废：退换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样本（5）进样器毁坏：退换进样器转子5、鬼峰（1）进样阀残存峰：屡屡用后用强溶剂洗濯阀,鼎新阀和样本的洗濯（2）样本中未知物：处置样本（3）柱未均衡：从新均衡柱,用固定相做样本溶剂(特别是离子对色谱)（4）三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱)：天天新配,用抗氧化剂（5）水浑浊(反相)：通过变动均衡时候检讨水原料，用HPLC级的水6、基线噪声（1）气泡(锋利峰)：固定相脱气,加柱背面压（2）浑浊(随机噪声)：洗濯柱,净化样本,用HPLC级试剂（3）探测器灯继承噪声：退换氘灯（4）电烦扰(偶尔噪声)：采纳稳压电源,检讨烦扰的来历(如水浴等)（5）探测器中有气泡：固定相脱气,加柱背面压7、峰拖尾（1）柱超载：低落样本量,增进柱直径采纳较高容量的静止相（2）峰烦扰：洁净样本,调度固定相（3）硅羟基影响：加三乙胺,用碱致钝化柱增进缓冲液或盐的浓度低落固定相PH值,钝化样本（4）同前4（4）：同前4（4）（5）同前4（3）：同前4（3）（6）死体积或柱外体积过大：联接点降至最低,对全数联接点做适宜调度,尽也许采纳细内径的联接收（7）柱效降落：用较低腐化前提,退换柱,采纳掩护柱8、峰展宽（1）进样体积过大：同4（1）（2）在进样阀中造成峰扩充：进样先后排出气泡以低落散布（3）数据系统采样速度太慢：设定速度应是每峰大于10点（4）探测器时候常数过大：设按时候常数为感意思第一峰半宽的10%（5）固定相粘渡太高：增进柱温,采纳低粘度固定相（6）探测池体积过大：用小体积池,脱掉热换取器（7）保存时候过长：等度洗脱时增进溶剂含量也可用梯度洗脱（8）柱外体积过大：将联接收径和联接收长度降至最小（9）样本过载：进小浓度小体积样本
修理阅历及准绳
输12
1.亲身反复毛病（纵然也许反复的话），不轻信誉户或第三者的口述或转述。注重检察，不轻信誉户的口述，特别是第三者的转述。有的操纵者为了推辞本身的肩负，会说仪器本身蓦地……，本身甚么也没动等等，这些都是也许领会的，工程师要会妥帖处置。
2.先外部，后内部。不要动不动就翻开机壳，没有开头的判定和清除就喜好铺
开摊子绝不是内行的做法。盼愿翻开机壳看那边有断线或显然毛病之处，纯洁是在碰幸运，纵然幸运也弗成能屡屡都如许。约有50%毛病是由外部处境或操纵、洁净等造成的。如能否关机时候长了？日夜温差能否很大？仪器安插的地方能否离电梯间很近?仪器邻近尚有甚么仪器在哄骗？谋略机设置能否无误？等等。
3.先电源，后主机；先附件，后主机。应先检讨电源能否不乱、负载能否太重、地线能否优良、电极等附件能否优良和寻常、各接口能否无误等。
4.充足欺诈仪器面板上种种按键、显示屏幕和操纵或修理程序等，做些清除，这需求极为熟识组织。（要紧环节）
5.认识用户的操纵习惯、操纵人员结媾和程度，科室经济情景等也会对修理有很大协助。如可估计洁净调养得何如，能否有欲革新的主意（不然不论何如修都不会说好）等。如笔者遭遇一台血球计数仪，前任几个工程师有数次修理，陆续二年，还换过新呆板，但不到半年又反复涌现毛病，费事陆续。我接办后有一次接报修，赶到时屏幕暗的，问医师是这台吗？医师回复是的，且向前按电源开关，按后无反响，就又按一下，呆板重启了。原本仪器有屏幕掩护功效，该科室无专人保存哄骗，哄骗者用好就走，后一哄骗者一看屏幕暗的，就开开关。天天数百次开关电源，怎有不坏之理？修睦后，我写了一个条子贴在仪器前，写明若发觉屏幕暗，先随便按一下任何键，不亮再开电源开关。以来就再也没这么费事了。
6.不轻松退换原本仪器上的元器件和板子、管道等，由于有些元器件与板子、软件数据关联。更不能*一直地换板子和部件来淘汰毛病源，不然招一民工教教即会（当前此类修理者至多，既可收费又简明）。
7.需求时仪器或工程师要担负肩负，背“黑锅”。若肩负在科室或哄骗者，往后更难打交道了。出于种种方针，也会涌现有人存心设置毛病。最佳解铃还须系铃人！不然很花时候。
修睦一台仪器阻挡易，特别是老仪器；搞坏一台仪器然则太简明了，不需求甚么常识。
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色谱罕见毛病及清除办法
1、柱压抬高
色谱柱入U滤片被固定相或样本中颗粒堵住。样本组分在滤片上沉没堵住滤片。脱掉出口讨论的滤片，哄骗1：1的硝酸溶液超声洗濯5min，再用水、甲醇洗濯撤退水分。样本及固定相哄骗0．45μm滤膜撤退微量杂质。哄骗固定相做溶剂配制样本。
2、新柱柱效低
柱外死体积大.样本在固定相中熔解不好，影响传质通过。退换联接收，从新联接色谱柱，低落死体积。哄骗适宜的固定相或哄骗固定相熔解样本。
3、旧色谱柱柱效低，别离不好，柱出口床层陷落。填料被固定相溶蚀而散失。用同型填料填补柱效可部份复原。对硅胶质填料，固定相PH值在2—7规模内，不然也许被溶蚀。
4、旧色谱柱柱效低别离不好，偶尔涌现双峰。
初学填料被浑浊变动而至。用强溶剂洗濯。刮除被浑浊的床层，用同型的填料填补柱效可部份复原。浑浊严峻，则废除或从新填装。
5、新柱接到仪器上后，柱头漏液。柱讨论与仪器之间联接收的压环变形量不够。用扳手顺时针方位拧紧1／4圈直到不漏液为止。
6、新柱接到仪器上后，启动仪器没有柱压降。
柱安插时候过长柱内充装的液梯己挥发干。继承开泵，用固定相将柱内气体置换掉。
7、新柱接到仪器上后，探测器出口陆续有小器泡涌现。
①同上。②固定相脱气不齐备特别是MeOH／H20体制由于氢键影响很简明涌现气泡。①同上。②配好固定相后必然要举办脱气处置。
8、新柱接到仪器上后柱压降陆续增进，以至超出仪器的耐压限。柱出口滤片被固体颗粒梗塞(或被毒菌梗塞)。退换或洗濯柱出口滤片；用0．45μm过滤膜过滤固定相撤退弱小颗粒物。
9、进样次数增进柱压降逐步增进。①样本中含有不溶于固定相的弱小颗粒物。②样本在固定相中析出弱小结晶。①用0．45μm过滤膜过滤样本。②举荐哄骗固定相熔解样本。
10、哄骗—段时候后，柱效降落，别离不好。①柱填料被固定相熔解而散失。②柱填料被样本杂质浑浊。①举荐哄骗予柱。如柱床层陷落，用类似型号填料填补。②举荐哄骗掩护柱或用强溶剂洗濯色谱柱撤退浑浊杂质。
11、柱哄骗一段时候后，柱效降落涌现双峰。柱出口床层被浑浊使柱填料变动。用强溶剂洗濯撤退杂质。
12、柱哄骗—段时候后，柱效降落，涌现峰拖尾。柱出口床层被浑浊。用强溶剂洗濯20-30ml，若成果不显然应废除。
13、进样量增大与峰面积增进弗成正比．即进样量与峰面积不是线性关联。样本在固定相中的熔解度小，惟有部份样本被固定相冲如色谱柱中而另一部份则堆积在柱人丁端。①用固定相熔解样本。②样本的浓度不宜太大。④进样量不宜过大。
14、哄骗缓冲液做固定相时，柱压降抬高很快。霉菌成长而至。①在固定相中参与有毒物资或加叠氯化钠避让霉菌成长。②实
15、用5μm颗粒填料柱时，以MeOH／H20做固定相柱压较高。MeOH与水之间由于氢键影响黏度增大。可用乙腈／水体制使柱压低落，别离效率更好。
16、万古间安插的色谱柱，涌现双峰。柱床层涌现干裂。柱安插时，最佳哄骗呼应的溶剂充填好，避让受大的呆板晃荡，如床层干裂应废除掉。
17、固定相洗濯强度由弱渐强时涌现很多杂质峰。强溶剂将弱溶剂洗不出的杂质冲出来。不影响柱的功能。
18、柱哄骗一段时候后保存值逐步淘汰。
柱中静止相散失而至。①退换色谱柱。②检讨所用的色谱前提能否适宜。
19、在UV色谱图中，靠拢死时候处涌现负峰。①进样时压力摇摆而至。②样本溶剂比固定相的UV吸取值低。
①采纳阀进样。②用固定相熔解样本。
液相色谱柱的
哄骗留神事变及更生
输12
1、色谱柱的哄骗讲解：
（1）色谱柱哄骗前留神事变
色谱柱的储蓄液无特别讲解，均为评估汇报所示的固定相。在哄骗前，必然要留神色谱柱的储蓄液与要解析样本的固定相能否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液做洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，不然缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简明析出，梗塞色谱柱。
（2）固定相
固定相中所哄骗的种种有机溶剂要尽也许哄骗色谱纯，配固定相的水最佳是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。纵然将所配得固定相再通过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，特别是含盐的固定相。其它，装固定相的容器和色谱系统中的在线过滤器等安设理当按期洗濯或退换。
以惯例硅胶为基质的键合相填料常常的PH值合用规模是2.0-8.0，BDSC18合适于碱性化合物，PH值合用规模为2.0-10.0。当必需求在PH值合用规模的边境前提下哄骗色谱柱时，屡屡哄骗完成后急忙用合适于色谱柱储蓄并与所哄骗的固定互相溶的溶剂洗濯，并齐备置换掉原本所哄骗的固定相。
（3）样本
样本也要尽也许洁净，可采用样本过滤器或样本预处置柱（SPE）对样本举办预处置；若样本不便处置，要哄骗掩护柱。在用正相色谱法解析样本时，全数的溶剂和样本应严刻脱水。
2、色谱柱的保存
（1）反相色谱柱天天试验后的调养
哄骗缓冲液或含盐的固定相，试验结尾后应用10%的甲醇/水洗濯30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇洗濯30分钟。留神：不能用纯水洗濯柱子，理当在水中参与10%的甲醇，避让将填料冲陷落。
（2）永久保存色谱柱
如色谱柱要万古间保存，必需存于适宜的溶剂下。关于反相柱也许储蓄于纯甲醇或乙腈中，正相柱也许储蓄于严刻脱水后的纯洁己烷中，离子换取柱也许储蓄于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将采办新色谱柱时附送的堵头堵上。储蓄的温度最佳是室温。
3、色谱柱的更生
由于色谱柱是损耗品，跟着使历时候或进样次数的增进，会涌现色谱峰高低落，峰宽加大或涌现肩峰的表象，时时来讲也许是柱效降落。
（1）反相柱的更生：顺次采纳20-30倍的色谱柱体积的甲醇∶水=10∶90（V/V），乙腈，异丙醇做为固定相洗濯色谱柱，结尾后再以相悖次第洗濯色谱柱。
（2）正相柱的更生：顺次以20-30倍色谱柱的体积的正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇做为固定相洗濯色谱柱，而后再以相悖的次第洗濯色谱柱。要留神上述溶剂必需严刻脱水。
4、色谱柱在哄骗通过中易涌现的题目妥协决法子
色谱柱在哄骗中最罕见的题目便是柱压抬高，纵然柱压是在万古间哄骗通过中迟缓增进，属于寻常表象。但柱压在哄骗通过中蓦地抬高（系统管路梗塞及压力传感器毛病除外），也许的缘故犹以下几点：
（1）色谱柱头的过滤筛板梗塞或浑浊；
（2）色谱柱头的填料被样本浑浊；
（3）色谱柱内缓冲液中的盐遭遇高浓度的甲醇或其余有机溶剂，造成结晶析出；
（4）固定相PH值过大或过小使静止相组织摧残或熔解。
束缚法子以下：
（1）如断定是色谱柱头的过滤筛板被浑浊，也许将色谱柱反方位用甲醇洗濯至寻常压力，也许脱掉色谱柱头，将其放在10％的稀硝酸内超声洗濯10分钟，后再用纯水超声10分钟，从新装入色谱柱。
（2）如断定色谱柱头的填料被浑浊，将柱头螺丝脱掉，挖出柱内前段被浑浊的填料，用类似的柱填料从新填入，注重修茸后，从新安置上柱头螺丝。
（3）如断定定是盐结晶，用10%的甲醇/水洗濯色谱柱使柱内盐整个熔解，再换高浓度甲醇。
（4）纵然因PH值哄骗欠妥，很难复原。
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HPLC平常维持归纳篇
1、压力反常
操纵压力的变动常常是毛病的征候。从下表中找出所检察到的表象，并在右边的列表中参考呼应的束缚办法。
A、没有压力显示，没有固定相固定
缘故
束缚办法
（1）电源题目
（1）接通电源，开机
（2）保障丝被烧坏
（2）退换保障丝
（3）掌握器设定不无误或设定失利
（3）a采用稳当的设定
b修茸或退换掌握器
（4）柱塞杆折断
（4）退换柱塞杆
（5）泵头内有空气
（5）溶剂脱气、启动泵抽出空气
（6）固定相不够
（6）a增进固定相
b退换出口滤头
（7）单向阀毁坏
（7）退换单向阀
（8）漏液
（8）拧紧或退换手紧讨论
B、固定相固定寻常，但没有压力显示
缘故
束缚办法
（1）仪容毁坏
（1）退换仪容
（2）压力传感器毁坏
（3）退换压力传感器
C、压力陆续偏高
缘故
束缚办法
（1）流速设定太高
（1）调度流速设定
（2）柱前筛板梗塞
（2）a在许可情景下反冲色谱柱
b退换筛板
c退换色谱柱
（3）固定相哄骗欠妥或缓冲盐的结晶沉没
（3）a哄骗稳当的固定相
b洗濯色谱柱
（4）色谱柱取舍欠妥
（4）取舍稳当的色谱柱
（5）进样阀毁坏
（5）洗濯或退换进样阀
（6）柱温过低
（6）提升温度
（7）掌握器反常
（7）修茸或退换掌握器
（8）掩护柱阻碍
（8）洗濯或退换掩护柱
（9）在线过滤器阻碍
（9）洗濯或退换在线过滤器
D、压力陆续偏低
缘故
束缚办法
（1）流速设定过低
（1）调度流速
（2）系统漏液
（2）断定漏液地方并修理
（3）色谱柱取舍欠妥
（3）取舍稳当的色谱柱
（4）柱温太高
（4）低落温度
（5）掌握器反常
（5）修理或退换掌握器
E、压力陆续高涨
缘故
束缚办法
见列表C
见列表C
F、压力降为零
缘故
束缚办法
见列表A、B
见列表A、B
G、压力陆续降落，但不回零
缘故
束缚办法
见列表D
见列表D
H、压力摇摆
缘故
束缚办法
（1）泵中有气体
（1）a溶剂脱气
b从泵中撤退气体
（2）单向阀毁坏
（2）退换单向阀
（3）泵密封毁坏
（3）退换泵密封
（4）脱气不充足
（4）a溶剂脱气
b变动脱气办法（哄骗在线脱气法等）
（5）系统漏液
（5）断定漏液地方并修理
（6）哄骗梯度洗脱
（6）由于固定相粘度的变动引发的压力摇摆
HPLC平常维持法子之二：漏液
常常也许通过拧紧或退换管路讨论来束缚漏液的题目。但值得留神的是过份拧紧会致使金属讨论的漏液和塑料讨论的磨损。纵然通过略微拧紧讨论不能束缚漏液的题目，就必需将讨论取下，检讨能否毁坏（比如，卡套毁坏、密封表面有杂质）；毁坏的讨论理当退换掉。
A、讨论处漏液
缘故
束缚办法
（1）讨论松动
（1）拧紧
（2）讨论磨损
（2）退换
（3）讨论过紧
（3）a拧松，再从新拧紧
b退换
（4）讨论被浑浊
（4）a拆下洗濯
b退换
（5）部件不般配
（5）哄骗统一品牌的配件
B、泵漏液
缘故
束缚办法
（1）单向阀松动
（1）a拧紧单向阀（不必拧的过紧）
b退换单向阀
（2）讨论松动
（2）拧紧讨论（不必拧的过紧）
（3）搀杂器密封毁坏
（3）a退换搀杂器密封
b退换搀杂器
（4）泵密封毁坏
（4）修理或退换泵密封件
（5）压力传感器毁坏
（5）修理或退换压力传感器
（6）脉冲阻尼器毁坏
（6）退换脉冲阻尼器
（7）比例阀毁坏
（7）a检讨隔阂，纵然漏液急忙退换
b检讨手紧讨论，毁坏的急忙退换
（8）放空阀的毁坏
（8）a拧紧放空阀
b退换放空阀
C、进样阀漏液
缘故
束缚办法
（1）转子密封毁坏
（1）从新安置或退换进样阀
（2）定量环阻碍
（2）退换定量环
（3）进样口密封松动
（3）调度
（4）进样针头尺寸不适宜
（4）哄骗稳当的进样针
（5）废液管中造成虹吸
（5）维持废液管高于废液液面
（6）废液管阻碍
（6）退换或疏通废液管
D、色谱柱漏液
缘故
束缚办法
（1）尾端讨论松动
（1）拧紧讨论
（2）卡套内有填料
（2）拆下、洗濯卡套、从新安置
（3）筛板厚度不适宜
（3）哄骗适宜的筛板（参考下表）
筛板取舍引导
物资粒径
筛板孔径
3-4u
0.5u
5-20u
2u
E、探测器漏液
缘故
束缚办法
（1）畅达池垫片毁坏
（1）a避让过大的后台压力（压力降）b退换垫片
（2）畅达池窗粉碎
（2）退换窗口
（3）手紧讨论漏液
（3）拧紧或退换
（4）废液管阻碍
（4）退换废液管
（5）畅达池阻碍
（5）从新安置或退换
HPLC平常维持法子之三：谱图的种种题目
液相色谱系统的很多题目都能在谱图上反响出来。个中有一些题目也许通过变动设立参数获得束缚；而其余的题目必需通过批改操纵程序来束缚。关于色谱柱和固定相的无误取舍是获得好的色谱图的关键。
A、峰拖尾
缘故
束缚办法
（1）筛板阻碍
（1）a反冲色谱柱
b退换出口筛板
c退换色谱柱
（2）色谱柱陷落
（2）填充色谱柱
（3）烦扰峰
（3）a哄骗更长的色谱柱
b变动固定相或退换色谱柱
（4）固定相PH取舍差错
（4）调度PH值。关于碱性化合物，低PH值更有益于获得对称峰
（5）样本与填料表面的熔解点产生反响
（5）a参与离子对试剂或碱性挥发性梳妆剂
b厘正色谱柱
B、峰前延
缘故
束缚办法
（1）柱温低
（1）抬高柱温
（2）样本溶剂取舍不稳当
（2）哄骗固定相做为样本溶剂
（3）样本过载
（3）低落样本含量
（4）色谱柱毁坏
（4）见A1、A2
C、峰分叉
缘故
束缚办法
（1）掩护柱或解析柱浑浊图
（1）取下掩护柱再举办解析。纵然需求退换掩护柱。纵然解析柱阻碍，拆下来洗濯。纵然题目仍旧存在，也许是柱子被强保存物资浑浊，应用合适的更生办法。纵然题目仍旧存在，出口也许被阻碍，退换筛板或退换色谱柱。
（2）样本溶剂不溶于固定相
（2）变动样本溶剂。纵然也许采用固定相做为样本溶剂。
D、峰变形
缘故
束缚办法
样本过载
淘汰样本载量
E、早出的峰变形
缘故
束缚办法
样本溶剂取舍不稳当
a、淘汰进样体积
b、应用低极性样本溶剂
F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
缘故
束缚办法
柱外效应
a调度系统联接（哄骗更短、内径更小的管路）
b哄骗小体积的畅达池
G、K’增进时，脱尾更严峻
缘故
束缚办法
（1）二级保存效应，反相形式
（1）a参与三乙胺（或碱性样本）
b参与乙酸（或酸性样本）
c参与盐或缓冲剂（或离子化样本）
d退换一支撑子
（2）二级保存效应，正相形式
（2）a参与三乙胺（或碱性样本）
b参与乙酸（或酸性样本）
c参与水（或多官能团化合物）
d试用另一种办法
（3）二级保存效应，离子对
（4）参与三乙胺（或碱性样本）
H、酸性或碱性化合物的峰拖尾
缘故
束缚办法
缓冲不适宜
a哄骗浓度50-mM的缓冲液
b哄骗Pka即是固定相PH值的缓冲液
I、额外的峰
缘故
束缚办法
（1）样本中有其余组份
（1）寻常
（2）前一次进样的洗脱峰
（2）a增进运转时候或梯度斜率
b提升流速
（3）空位或鬼峰
（3）a检讨固定相能否纯朴
b哄骗固定相做为样本溶剂
c淘汰进样体积
J、保存时候摇摆
缘故
束缚办法
（1）温控欠妥
（1）调好柱温
（2）固定相组分变动
（2）避让变动（挥发、反响等）
（3）色谱柱没有均衡
（3）在每一次运转以前予以充足的时候均衡色谱柱
K、保存时候不短变动
缘故
束缚办法
（1）流速变动
（1）从新设定流速
（2）泵中有气泡
（2）从泵中撤退气泡
（3）固定相取舍不稳当
（3）a退换适宜的固定相
b取舍适宜的搀杂固定相
L、基线漂移
缘故
束缚办法
（1）柱温摇摆。（纵然是很小的温度变动城市引发基线的摇摆。常常影响示差探测器、电导探测器、较低敏捷度的紫外探测器或其余光电类探测器。）
（1）掌握好柱子和固定相的温度，在探测器以前哄骗热换取器
（2）固定相不平匀。（固定相前提变动引发的基线漂移大于温度致使的漂移。）
（2）哄骗HPLC级的溶剂，高纯度的盐和增加剂。固定相在哄骗行举办脱气，哄骗中哄骗氦气。
（3）畅达池被浑浊或有气体
（3）用甲醇或其余强极性溶剂洗濯畅达池。如有需求，也许用1N的硝酸。（不要用盐酸）
（4）探测器出口阻碍。（高压造成畅达池窗口分割，造成噪音基线）
（4）掏出阻碍物或退换管子。参考探测器手册退换畅达池窗。
（5）固定相配比欠妥或流速变动
（5）厘正配比或流速。为避让这个题目可按期检讨固定相构成及流速。
（6）柱均衡慢，特别是固定相产生变动时
（6）用中等强度的溶剂举办洗濯，厘正固定相时，在解析前用10-20倍体积的新固定相对柱子举办洗濯。
（7）固定相浑浊、变动或由下品格溶剂配成
（7）检讨固定相的构成。哄骗高品格的化学试剂及HPLC级的溶剂
（8）样本中有强保存的物资（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，进而显现出一个逐步抬高的基线。
（8）哄骗掩护柱，如有需求，在进样之偶尔在解析通过中，按期用强溶剂洗濯柱子。
（9）哄骗轮回溶剂，但探测器未调度。
（9）从新设定基线。当探测器动力学规模产生变动时，哄骗新的固定相。
（10）探测器没有设定在最大吸取波所长。
（10）将波长调度至最大吸取波所长
M、基线噪音（规定的）
缘故
束缚办法
（1）在固定相、探测器或泵中有空气
（1）固定相脱气。洗濯系统以撤退探测器或泵中的空气。
（2）漏液
（2）见第三部份。检讨管路讨论能否松动，泵能否漏液，能否有盐析出和不寻常的噪音。如有需求，退换泵密封。
（3）固定相搀杂不齐备
（3）用手摇摆使搀杂平匀或哄骗低粘度的溶剂
（4）温度影响（柱温太高，探测器未加热）
（4）淘汰不同或加之热换取器
（5）在统一条线上有其余电子设立
（5）断开LC、探测器和纪录仪，检讨烦扰能否来自于外部，加以修正。
（6）泵震荡
（6）在系统中参与脉冲阻尼器
N、基线噪音（不规定的）
缘故
束缚办法
（1）漏液
（1）见第三部份。检讨讨论能否松动，泵能否漏液，能否有盐析出和不寻常的噪音。如有需求，退换密封。检讨畅达池能否漏液。
（2）固定相浑浊、变动或由低质溶剂配成
（2）检讨固定相的构成。
（3）固定相各溶剂不相溶
（3）取舍互溶的固定相
（4）探测器/纪录仪电子元件的题目
（4）断开探测器和纪录仪的电源，检讨并修正。
（5）系统内有气泡
（5）用强极性溶液洗濯系统
（6）探测器内有气泡
（6）洗濯探测器，在探测器背面安置后台压力调治器
（7）畅达池浑浊（纵然是少许的浑浊物也会造成噪音。）
（7）用1N的硝酸（不能用磷酸）洗濯畅达池
（9）探测器灯能量不够
（8）退换灯
（10）色谱柱填料散失或阻碍
（9）退换色谱柱
（11）固定相搀杂不平匀或搀杂器做事不寻常
（10）修理或退换搀杂器，在固定相不走梯度时，发起不哄骗泵的搀杂安设
O、宽峰
缘故
束缚办法
（1）固定相构成变动
（1）从新制备新的固定相
（2）固定相流速过低
（2）调治流速
（3）漏液（特别是在柱子和探测器之间）
（3）见section3。检讨讨论能否松动、泵能否漏液、能否有盐析出以及不寻常的噪音。纵然需求退换密封。
（4）探测器设定不无误
（4）调度设定
（5）柱外效应影响
a柱子过载
b探测器对反合时候或池体积呼应过大
c柱子与探测器之间的管途经长或管路内径太大
d纪录仪响合时候过长
（5）a、小体积进样（比如：10ul而不是ul）以1：10或1：的比例稀释样本
b、淘汰响合时候或哄骗更小的畅达池
c、哄骗内径为0.-0.01的短管路
d、淘汰响合时候
（6）缓冲液浓度过低
（6）增进浓度
（7）掩护柱浑浊或做废
（7）退换掩护柱
（8）色谱柱浑浊或做废，塔板数较低
（8）退换相同范例的色谱柱。纵然新柱子也许供应对称的色谱峰，则用强溶剂洗濯旧柱子。
（9）柱出口陷落
（9）翻开柱出口，填补陷落或退换柱子
（10）显现两个或多个未被齐备别离的物资的峰
（10）取舍其余范例的色谱柱以改革别离成果
（11）柱温过低
（11）提升柱温。除非特别情景，温度不宜超出75℃
（12）探测器时候常数太大
（12）哄骗较小的时候常数
P、别离度低落
缘故
束缚办法
（1）固定相浑浊或变动（引发保存时候变动）
（1）从新设置固定相
（2）掩护柱或解析柱阻碍
（2）去掉掩护柱举办解析。纵然需求则退换掩护柱。纵然解析柱阻碍，可举办反冲。纵然题目仍旧存在色谱柱也许被强保存的浑浊物毁坏，发起哄骗稳当的更生程序。纵然题目仍旧存在，出口也许阻碍了，退换出口处的筛板或退换色谱柱。
Q、全数的峰面积都过小
缘故
束缚办法
（1）探测器衰减设定太高
（1）淘汰衰减的设定
（2）探测器时候常数设定太大
（2）设定较小的时候常数
（3）进样量太少
（3）增猛进样量
（4）纪录仪联接欠妥
（4）哄骗无误的联接
R、全数的峰面积都太大
缘故
束缚办法
（1）探测器衰减设定过低
（1）采用较大的衰减
（2）进样过量
（2）淘汰进样量
（3）纪录仪联接不无误
（3）无误联接纪录仪
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